凝膠電泳原理

凝膠電泳（英語(yǔ)：Gel electrophoresis）或稱膠體電泳，是一種用于大分子（如DNA、RNA、蛋白質(zhì)）以及其碎片的分離、分析技術(shù)。該技術(shù)被科學(xué)工作者用于分離具有不同物理性質(zhì)（大小、電荷、等電點(diǎn)）的分子。凝膠電泳通常用于分析用途，但也可以作為預(yù)處理技術(shù)，在進(jìn)行質(zhì)譜、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、克隆、DNA測(cè)序或者免疫印跡等檢測(cè)之前，進(jìn)行分子的純化。（維基）

電泳的定義：施加電場(chǎng)后，離子和帶電大分子在基質(zhì)中的運(yùn)動(dòng)。

瓊脂糖和聚丙烯酰胺是蛋白核酸等大分子電泳基質(zhì)。大分子因?yàn)榇笮?、電荷和結(jié)構(gòu)的不同在電泳基質(zhì)中分離。

蛋白分離基礎(chǔ)：大小、結(jié)構(gòu)、電荷。

核酸分離基礎(chǔ)：主要是大小。堿基組成和序列對(duì)電泳速度影響較小。

在分離蛋白質(zhì)和在分離小核酸時(shí)凝膠通常由不同濃度的丙烯酰胺和交聯(lián)劑聚合而成；分離大一點(diǎn)的核酸時(shí)（長(zhǎng)度超過(guò)幾百個(gè)堿基），純化的瓊脂更適合作為基質(zhì)。

大分子電泳電學(xué)基礎(chǔ)：

歐姆定律：V=IR

W=IV

電泳期間，其中一個(gè)參數(shù)固定，其余兩個(gè)隨著電泳系統(tǒng)電阻的變化而改變。

垂直系統(tǒng)中，導(dǎo)電離子如氯離子電泳出膠后，凝膠電阻會(huì)增加。

水平系統(tǒng)中，電阻變化很小。不過(guò)，高壓和增加跑膠長(zhǎng)度能降低電阻。

固定不同參數(shù)各有優(yōu)缺點(diǎn)。

測(cè)序凝膠一般固定功率，以保持溫度的一致。

用于蛋白質(zhì)和DNA分離的瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠一般固定電壓或電流。

Reference

1. Rickwood, D. and Hames, B.D., Gel Electrophoresis of Nucleic Acids: A Practical Approach, IRL Press Limited, 1982.

上海紅榮微再公司在中國(guó)代理銷售的LONZA瓊脂糖系列產(chǎn)品是由位于美國(guó)Rockland的子公司生產(chǎn)，該子公司主要研發(fā)生產(chǎn)：分子生物學(xué)和基于細(xì)胞檢測(cè)的生物技術(shù)類產(chǎn)品。分子生物學(xué)產(chǎn)品主要包括DNA/RNA分離、蛋白分離的等電聚焦凝膠電泳類產(chǎn)品；細(xì)胞檢測(cè)類的產(chǎn)品有體外毒理檢測(cè)、藥物篩選研究、細(xì)胞健康檢測(cè)；LONZA瓊脂糖粉已經(jīng)成為世界上zui大的瓊脂糖粉生產(chǎn)供應(yīng)商，產(chǎn)品不僅僅應(yīng)用在*范圍內(nèi)的學(xué)術(shù)研究、政府公共研究、生物技術(shù)公司、生物制藥公司，更重要的是現(xiàn)在已經(jīng)成功進(jìn)入個(gè)人護(hù)理、化妝品和醫(yī)療等廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域，被譽(yù)為世界上技術(shù)zui高、質(zhì)量的瓊脂糖產(chǎn)品。

LONZA瓊脂糖粉產(chǎn)品系列

在等電聚焦凝膠電泳類產(chǎn)品中，LONZA瓊脂糖粉分為：低熔點(diǎn)瓊脂糖粉（Low Melting Agarose）、高分辨率瓊脂糖粉（High Sieving Agarose）、標(biāo)準(zhǔn)熔點(diǎn)瓊脂糖粉（Standard Melting Agarose）和其它應(yīng)用瓊脂糖粉。下面為L(zhǎng)ONZA瓊脂糖粉詳細(xì)介紹：

分子生物學(xué)級(jí)別的瓊脂糖粉：SeaKem LE，SeaPlaque和NuSieve 3:1。

遺傳學(xué)技術(shù)級(jí)別的瓊脂糖粉：SeaKem GTG，SeaPlaque GTG，NuSieve GTG，Seakem Gold和Incert。

LONZA瓊脂糖粉的分類：

①標(biāo)準(zhǔn)熔點(diǎn)瓊脂糖粉

SeaKem LE瓊脂糖粉：

屬分子生物學(xué)級(jí)別，是進(jìn)行核酸電泳和印跡分析的理想凝膠。每塊凝膠均能提供清晰的DNA條帶及一致的分辨能力。不含可檢測(cè)到的DNase和RNase活性，具有高強(qiáng)度、低背景等優(yōu)點(diǎn)。因其電滲（EEO）較低，故DNA在凝膠中的遷移速度較快。同時(shí)可在Ouchterlony和放射免疫擴(kuò)散（RID）實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行蛋白凝膠電泳。（為保證對(duì)DNA修飾酶產(chǎn)生zui小的抑制作用，特推薦使用SeaKem GTG瓊脂糖，因?yàn)檫@種遺傳學(xué)技術(shù)級(jí)別的瓊脂糖能與限制性消化，DNA連接和克隆等操作中所使用的酶高度兼容。）

SeaKem LE瓊脂糖粉的應(yīng)用：DNA和RNA的電泳和印跡、免疫沉淀。

廠家品牌 貨號(hào)   產(chǎn)品名稱                包裝規(guī)格

LONZA  50001  Seakem LE Agarose瓊脂糖粉 25g

LONZA  50000  Seakem LE Agarose瓊脂糖粉 125g

LONZA  50004  Seakem LE Agarose瓊脂糖粉 500g

SeaKem GTG瓊脂糖粉

屬遺傳學(xué)技術(shù)級(jí)別，是標(biāo)準(zhǔn)膠凝溫度，高凝膠強(qiáng)度的瓊脂糖。可分辨大于1000bp的DNA fragment。主要用于DNA電泳從“SeaKem GTG瓊脂糖”凝膠中回收的DNA可放心的用于限制性消化和連接反應(yīng)。

SeaKem GTG瓊脂糖粉的應(yīng)用：DNA和RNA回收、DNA和RNA的電泳及印跡。

廠家品牌 貨號(hào)      產(chǎn)品名稱             包裝規(guī)格  

LONZA  50071 Seakem GTG Agarose瓊脂糖粉 25g

LONZA  50070 Seakem GTG Agarose瓊脂糖粉 125g

LONZA  50074 Seakem GTG Agarose瓊脂糖粉 500g

NuSieve 3:1瓊脂糖粉

屬分子生物學(xué)級(jí)別，標(biāo)準(zhǔn)熔點(diǎn)，用于制備適于鑒定小片段DNA，RNA和≦1kb的PCR產(chǎn)物的高強(qiáng)度凝膠。主要用于分析電泳，以提高跑膠和印跡的速度。其性能檢測(cè)確保10bp-1500bp范圍的DNA fragment均能獲得良好的分辨效果。（如果您需要使用低熔點(diǎn)瓊脂糖，特推薦NuSieve GTG瓊脂糖 產(chǎn)品，研究證實(shí)其適用于那些需要與克隆實(shí)驗(yàn)中所使用的酶*兼容的應(yīng)用。）

NuSieve 3:1瓊脂糖粉的應(yīng)用：小片段DNA和RNA分析，小片段DNA和RNA的Southern blotting和Northern blotting。

廠家品牌 貨號(hào)    產(chǎn)品名稱                包裝規(guī)格

LONZA  50091  NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 25g

LONZA  50090  NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 125g

LONZA  50094  NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 500g

②低熔點(diǎn)瓊脂糖粉

SeaPlaque瓊脂糖粉：

屬分子生物學(xué)級(jí)別，是一種低熔點(diǎn)瓊脂糖，所制凝膠具有更高的篩過(guò)特性，更透明。是理想的DNA和RNA電泳產(chǎn)品，也適合組織培養(yǎng)細(xì)胞的克隆和病毒空斑分析。

為保證在凝膠中進(jìn)行的DNA酶反應(yīng)不受影響，特推薦使用SeaPlaque GTG瓊脂糖，這種瓊脂糖已被證明其對(duì)一些常規(guī)性的用于膠內(nèi)操作（如限制型消化，克隆）的酶顯示出zui小的抑制作用。DNase和RNase活性未檢測(cè)到。

SeaPlaque瓊脂糖粉的應(yīng)用：DNA和RNA電泳、病毒空斑檢測(cè)、細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞的克隆。

廠家品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品名稱                  包裝規(guī)格

LONZA  50101 SeaPlaque AGAROSE瓊脂糖粉 25G

LONZA  50100 SeaPlaque AGAROSE瓊脂糖粉 125G

SeaPlaque GTG瓊脂糖粉

屬遺傳學(xué)技術(shù)級(jí)別，用于分離大于1000bp的DNA和PCR產(chǎn)物片段。這種低熔點(diǎn)瓊脂糖zui適于直接對(duì)重熔瓊脂糖中的核酸進(jìn)行酶學(xué)操作，而無(wú)需額外的DNA純化步驟；也適合在重熔瓊脂糖凝膠中進(jìn)行PCR及測(cè)序反應(yīng)。

 SeaPlaque GTG瓊脂糖粉的應(yīng)用：大片段DNA的分析和回收、凝膠內(nèi)PCR反應(yīng)（In-gelPCR）、凝膠內(nèi)（In-gel）連接和轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)、DNA和RNA的消化。

廠家品牌 貨號(hào)  產(chǎn)品名稱                   包裝規(guī)格  

LONZA 50111 SeaPlaque GTG AGAROSE瓊脂糖粉 25G  

LONZA 50110 SeaPlaque GTG AGAROSE瓊脂糖粉 125G  

 SeaPrep瓊脂糖粉

是一種*的“軟瓊脂糖”，具有超低的膠凝及熔化溫度。用于雜交瘤克隆及制造軟的，高純度凝膠。它以一種嚴(yán)格的具有代表性的模式擴(kuò)增cDNA文庫(kù)，減少在擴(kuò)增的過(guò)程中由于不同復(fù)制率所引起的低豐度克隆丟失的可能性。

 SeaPrep瓊脂糖粉的應(yīng)用：細(xì)胞培養(yǎng)、雜交瘤克隆、封裝/包埋細(xì)胞。

廠家品牌 貨號(hào)     產(chǎn)品名稱          包裝規(guī)格  

LONZA  50302 SeaPrep Agarose瓊脂糖粉 25g  

NuSieve GTG瓊脂糖粉

屬遺傳學(xué)技術(shù)級(jí)別，低熔點(diǎn)，能有效的分辨10bp-1000bp的DNA fragment, PCR和RT-PCR產(chǎn)物；使用該瓊脂糖制備凝膠不僅易于操作并且可保證不同批次產(chǎn)品間一致的電泳遷移速度，可直接在重熔NuSieve GTG瓊脂糖中進(jìn)行克隆操作，無(wú)需DNA的抽提步驟。這種瓊脂糖也適用于各種需在重熔瓊脂糖凝膠中進(jìn)行的反應(yīng)。該產(chǎn)品經(jīng)檢測(cè)并證實(shí)能夠支持在重熔瓊脂糖凝膠中直接進(jìn)行DNA連接和轉(zhuǎn)化。

 NuSieve GTG瓊脂糖粉的應(yīng)用：小片段DNA的分析和回收、凝膠內(nèi)PCR反應(yīng)（In-gelPCR）凝膠內(nèi)（In-gel）連接和轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。

廠家品牌 貨號(hào)       產(chǎn)品名稱            包裝規(guī)格  

LONZA  50081 NuSieve GTG Agarose瓊脂糖粉 25g   

LONZA  50080 NuSieve GTG Agarose瓊脂糖粉 125g  

LONZA  50084 NuSieve GTG Agarose瓊脂糖粉 500g  

③高分辨率瓊脂糖粉

MetaPhor瓊脂糖粉

是一種中熔點(diǎn)瓊脂糖，提供兩倍于的篩過(guò)瓊脂糖產(chǎn)品的分辨能力。MetaPhor瓊脂糖可用于水平凝膠電泳分辨20bp-800bp的DNA fragment,PCR和RT-PCR產(chǎn)物，分辨能力約為DNA fragment大小的2%。MetaPhor瓊脂糖凝膠（2%-4%）與聚丙烯酰胺凝膠（4%-8%）的分辨率接近。這些凝膠zui適于分辨AMPFLPs,STRs,三核苷酸和四核苷酸重復(fù)序列。

 MetaPhor瓊脂糖粉的應(yīng)用：小片段PCR產(chǎn)物分析、STR分析、RT-PCR。

廠家品牌 貨號(hào)        產(chǎn)品名稱         包裝規(guī)格  

LONZA  50181 MetaPhor Agarose瓊脂糖粉 25g  

LONZA  50180 MetaPhor Agarose瓊脂糖粉 125g  

LONZA  50184 MetaPhor Agarose瓊脂糖粉 500g  

NuSieve 3:1瓊脂糖粉

屬分子生物學(xué)級(jí)別，標(biāo)準(zhǔn)熔點(diǎn)，用于制備適于鑒定小片段DNA，RNA和≦1kb的PCR產(chǎn)物的高強(qiáng)度凝膠。主要用于分析電泳，以提高跑膠和印跡的速度。其性能檢測(cè)確保10bp-1500bp范圍的DNA fragment均能獲得良好的分辨效果。（如果您需要使用低熔點(diǎn)瓊脂糖，特推薦NuSieve GTG瓊脂糖 產(chǎn)品，研究證實(shí)其適用于那些需要與克隆實(shí)驗(yàn)中所使用的酶*兼容的應(yīng)用。）

 NuSieve 3:1瓊脂糖粉的應(yīng)用：小片段DNA和RNA分析、RT-PCR，小片段DNA和RNA的Southern blotting和Northern blotting。

廠家品牌 貨號(hào)   產(chǎn)品名稱               包裝規(guī)格  

LONZA  50091 NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 25g  

LONZA  50090 NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 125g  

LONZA  50094 NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 500g  

④Identity瓊脂糖粉

I.D.NA瓊脂糖粉

是一種高強(qiáng)度的低滲瓊脂糖，用于在DNA鑒定測(cè)試中保證DNA分辨能力的一致性。經(jīng)證實(shí)，在DNA鑒定實(shí)驗(yàn)條件下可獲得區(qū)分VNTRs,HVRs,RFLPs及DNA大小標(biāo)準(zhǔn)物所需的清晰明亮的DNA條帶。這種瓊脂糖顯示出較高的印跡DNA轉(zhuǎn)移效率和DNA圖譜分析所需的不同批號(hào)產(chǎn)品的一致性。

 I.D.NA瓊脂糖粉的應(yīng)用：DNA鑒定測(cè)試。

廠家品牌 貨號(hào)     產(chǎn)品名稱        包裝規(guī)格  

LONZA  50121 InCert Agarose瓊脂糖粉 1g  

LONZA  50123 InCert Agarose瓊脂糖粉 5g  

⑤高純度瓊脂糖粉

IsoGel瓊脂糖粉

于等電聚焦電泳（IEF），減少靜息的陽(yáng)離子及運(yùn)動(dòng)陽(yáng)離子的制造程序使之具有檢測(cè)不到的EEO。除了能灌制垂直及水平的薄膠外，還具有足夠的強(qiáng)度用于在垂直管內(nèi)制膠。

IsoGel瓊脂糖粉的應(yīng)用：等電聚焦電泳。

廠家品牌 貨號(hào)      產(chǎn)品名稱        包裝規(guī)格  

LONZA  50202 Iso Gel Agarose瓊脂糖粉 25g  

大量現(xiàn)貨

LONZA SeaKem® Gold Agarose金瓊脂糖粉，超長(zhǎng)DNA凝膠電泳

產(chǎn)品英文名 SeaKem® Gold Agarose

產(chǎn)品中文名 SeaKem®金瓊脂糖粉

適用：長(zhǎng)片段及超長(zhǎng)片段DNA跑膠

SeaKem® Gold Agarose是一種高凝膠強(qiáng)度，低EEO（電滲），標(biāo)準(zhǔn)凝膠溫度的瓊脂糖。這種遺傳學(xué)技術(shù)級(jí)別（Genetic Technology Grade™ Agarose）的瓊脂糖zui適于在脈沖場(chǎng)凝膠電泳法（pulsed field gel electrophoresis-PFGE）實(shí)驗(yàn)中快速分辨巨大堿基對(duì)DNA：長(zhǎng)片段及超長(zhǎng)片段DNA。由于SeaKem®Gold Agarose金膠瓊脂糖的低EEO特性，在SeaKem®Gold瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)中，DNA電泳遷移率遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)傳統(tǒng)的瓊脂糖凝膠電泳。PFGE的跑膠時(shí)間依使用的緩沖液和瓊脂糖濃度的不同可減少至原電泳時(shí)間的50%。因其高凝膠強(qiáng)度，即使是使用低濃度（0.5%的SeaKem Gold瓊脂糖凝膠），操作處理依然很方便，從而允許在常規(guī)電泳中分離更大的DNA fragment并減少PFGE中的DNA分離的耗時(shí)。為了更好的在PFGE電泳后對(duì)大片段DNA fragment回收，推薦使用 SeaPlaque™ GTG™ Agarose和ß-Agarase。

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