Corning NK 細(xì)胞活化擴(kuò)增套裝和競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品的比較

Corning® NK細(xì)胞活化擴(kuò)增培養(yǎng)套裝支持NK細(xì)胞的快速擴(kuò)增，NK細(xì)胞產(chǎn)量高（約8.6 萬(wàn)億，擴(kuò)增290倍），細(xì)胞殺傷力強(qiáng)（效應(yīng)細(xì)胞：靶細(xì)胞=5:1 下殺傷力77.9%），與競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品相比很有優(yōu)勢(shì)。

Corning NK 細(xì)胞活化擴(kuò)增套裝可以用于NK細(xì)胞的大量擴(kuò)增，并且具有高活力和高殺傷能力。Corning NK 細(xì)胞活化擴(kuò)增套裝飽和預(yù)包被T-75培養(yǎng)瓶，KBM NK活化培養(yǎng)基，KBM NK活化添加劑和KBM NK擴(kuò)增培養(yǎng)基。前三個(gè)特別設(shè)計(jì)用于NK活化，zui后一個(gè)KBM NK擴(kuò)增培養(yǎng)基于NK細(xì)胞擴(kuò)增。NK活化培養(yǎng)基和擴(kuò)增培養(yǎng)基生產(chǎn)都是使用高質(zhì)量試劑和cGMP級(jí)的原料。培養(yǎng)基唯二所含培養(yǎng)基是注射級(jí)的血清白蛋白和重組人胰島素。

介紹

自然殺傷細(xì)胞（NK）是重要的免疫細(xì)胞，能識(shí)別并清除腫瘤和病毒感染。體外大量培養(yǎng)NK細(xì)胞，滿(mǎn)足過(guò)繼性免疫治療所需一向比較困難。據(jù)資料，現(xiàn)有的培養(yǎng)方法都是采用擴(kuò)增培養(yǎng)基搭配細(xì)胞因子（IL-2，IL-7，IL-15）的方案，需要研究者自行優(yōu)化后使用。

Corning NK 細(xì)胞活化擴(kuò)增套裝提供了NK 細(xì)胞活化擴(kuò)增的全套材料和標(biāo)準(zhǔn)操作方法，所得NK細(xì)胞擴(kuò)增能力強(qiáng)，活性和殺傷能力高。研究者無(wú)需優(yōu)化，而且使用步驟精簡(jiǎn)。和競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品比較了NK細(xì)胞產(chǎn)量，活力和NK 細(xì)胞體外 陽(yáng)性表達(dá)比率和殺傷能力。

鑒定方法

免疫表型

收獲細(xì)胞表面標(biāo)記表達(dá)評(píng)估方法：CD3-CD56+陽(yáng)性率。

100 μL PBS 加入 1 x 10⁶ 個(gè)細(xì)胞，CD3 FITC +CD56 PE抗體染色 20min，染色過(guò)程 室溫避光。孵育后，PBS 緩沖液清洗細(xì)胞，200 μL PBS 重懸，用于流式細(xì)胞分析。每個(gè)樣本收集1萬(wàn)個(gè)events，再用histogram overlay subtraction method using BD Accuri C6 軟件。

CCK-8 細(xì)胞毒性檢測(cè)

 K-562 細(xì)胞作為靶細(xì)胞。1 x 10⁵ cells/mL的K-562 細(xì)胞和 5 x 10⁵ cells/mL的效應(yīng)細(xì)胞共培養(yǎng)（96孔培養(yǎng)板三份，終體積200 μL/孔），37°C 過(guò)夜。分析前，每孔添加20 μL細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑（ Cell Counting Kit-8 solution ，CCK8, Sigma Cat. No. 96992）， 37°C ，5% CO2孵育1 h。數(shù)據(jù)讀?。篠pectraMax® M4 (Molecular Devices) multifunction microplate reader。

結(jié)果

圖1 使用不同品牌的NK擴(kuò)增試劑盒比較細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)和擴(kuò)增能力。與競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品B，C相比，Corning® NK細(xì)胞活化擴(kuò)增培養(yǎng)套裝擴(kuò)增能力具有優(yōu)勢(shì)。

圖2 CCK-8 細(xì)胞殺傷活性檢測(cè)。NK細(xì)胞與K-562細(xì)胞共培養(yǎng)16 h后（效應(yīng)細(xì)胞：靶細(xì)胞=5:1 ），Corning® NK細(xì)胞活化擴(kuò)增培養(yǎng)套裝培養(yǎng)的NK 細(xì)胞殺傷能力77.9%，比競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品B (54.1%) 和C(57.6%) 有優(yōu)勢(shì)。

圖3 流式細(xì)胞分析NK細(xì)胞表面標(biāo)志物。使用CD3-CD56+陽(yáng)性率評(píng)估收獲細(xì)胞中NK細(xì)胞占比。Corning® NK細(xì)胞活化擴(kuò)增培養(yǎng)套裝占比83.0%，高于競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品B (67.6%)和C(6.4%)。

結(jié)論
Corning® NK細(xì)胞活化擴(kuò)增培養(yǎng)套裝支持NK細(xì)胞的快速擴(kuò)增，NK細(xì)胞產(chǎn)量高（約8.6 萬(wàn)億，擴(kuò)增290倍），細(xì)胞殺傷力強(qiáng)（效應(yīng)細(xì)胞：靶細(xì)胞=5:1 下殺傷力77.9%），與競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品相比很有優(yōu)勢(shì)。

Corning NK 細(xì)胞活化擴(kuò)增套裝提供了NK 細(xì)胞活化擴(kuò)增的全套材料和標(biāo)準(zhǔn)操作方法。無(wú)需優(yōu)化，而且使用步驟十分精簡(jiǎn)。

原文：Zhu Xuejing, Liu Jian Corning Incorporated

Corning Life Sciences Asia Technology Center Shanghai 201206, China