細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)是在細(xì)胞房中進(jìn)行,在超凈工作臺或生物安全柜中,把細(xì)胞處理好,根據(jù)需要加入細(xì)胞培養(yǎng)基,放入細(xì)胞培養(yǎng)瓶/皿或細(xì)胞培養(yǎng)板中,再放到帶有5% CO2 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)4要素
1.類型:懸浮細(xì)胞/貼壁細(xì)胞
2.培養(yǎng)基:(無)血清/Buffer/抗生素/無菌過濾
3.培養(yǎng)環(huán)境:CO2濃度/O2濃度
4.培養(yǎng)耗材:處理&未處理表面/特殊包被
流程:
1. 剪切組織 先將所取得的組織清洗剪切至糊狀,靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2. 消化分離 消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3. 培養(yǎng) 細(xì)胞懸液用計數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為實驗所需密度,分裝于培養(yǎng)皿/培養(yǎng)板/培養(yǎng)瓶中。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
產(chǎn)品信息:
GEB | AT050H-H-N-LB | 50ul Hamilton吸頭,盒裝,低吸附 |
GEB | AT020T-H-N | 20ul Tecan吸頭,盒裝 |
GEB | AT020T-H-N-LB | 20ul Tecan吸頭,盒裝,低吸附 |
GEB | AT050M-9-N | 50ul Mac 吸頭,盒裝 |
GEB | AT050M-9-N-LB | 50ul Mac吸頭,盒裝,低吸附 |
GEB | AT250A-9-N-LB | 250ul Agilent吸頭,盒裝,低吸附 |
GEB | AT250B2-9-N | 250ul Beckman吸頭,盒裝 |
GEB | AT250B2-9-N-LB | 250ul Beckman 吸頭,盒裝,低吸附 |
GEB | AT050H-H-N | 50ul Hamilton吸頭,盒裝 |
GEB | AT050H-H-N-LB | 50ul Hamilton吸頭,盒裝,低吸附 |
LifeLine | LL-0023 | Epithelial氣道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基套裝【LM-0007 和 LS-1047】 |
Corning | 10-040-CV | RPMI 1640培養(yǎng)基(含谷氨酰胺) |
BD | 210340 | 無菌包裝RODAC培養(yǎng)基 |
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