反轉錄試劑盒是一種高效、穩(wěn)定、快速并可以去除基因組DNA污染的反轉錄系統(tǒng)。試劑盒采用分子進化技術多點突變的新一代反轉錄酶LabScript M-MuLV RTase,大幅度提高了穩(wěn)定性和反轉錄效率。
本試劑盒為一管式反轉錄預混反應液,5×RT MasterMix II中含有反轉錄第一鏈合所需的所有試劑。
通常Real-Time RT-PCR等實驗需要先用DNase I消化去除RNA中殘留的基因組DNA(gDNA),但是傳統(tǒng)DNase I處理復雜并容易造成RNA的降解和損失。
本試劑盒中使用了具有DNA分解活性的特殊4×gDNA Eraser Mix,2分鐘消除gDNA殘留,不需要DNase消化和后續(xù)繁瑣步驟。
下面讓我們一起來了解一下反轉錄試劑盒的特點吧:
1.制品為預先混好的Premix形式,只需加入模板RNA和水便可以開始反應。
2.可以在較短時間內高效合成Real Time PCR用cDNA,是進行2 Step Real Time RT-PCR反應的理想試劑。
3.使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer 2種反轉錄引物,可以合成適合Real Time PCR用cDNA。
4.新一代反轉錄酶LabScript M-MuLV RTase大幅度提高了穩(wěn)定性和反轉錄效率。
5.采用gDNA Eraser僅需2分鐘清除DNA殘留,不需要DNase消化和后續(xù)繁瑣步驟。
6.全預混的反轉錄Mix,只需加入RNA和水,15分鐘簡單快速完成反轉錄。
7.同時2種Mix在-20℃不易凍結,減少了化凍和混勻時間,使用更簡單。
8.本產品針對qPCR進行特別優(yōu)化oligo dT和N6隨機引物配比,使cDNA合成可從RNA轉錄本的各個區(qū)域起始并具有相同的反轉錄效率,大程度保證了qPCR結果的真實性和可重復性。
9. Real-time RT PCR定量需要建立標準曲線,建立標準曲線的條件就是需要將總RNA和反轉錄cDNA稀釋到較低的濃度。如果用水或TE Buffer稀釋時,由于模板濃度低不穩(wěn)定,因而會縮小曲線范圍,結果準確度降低。本制品中附加了標準曲線制作用稀釋液EASY Dilution (for Real Time PCR),將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時也能夠進行準確稀釋,容易在寬廣范圍內獲得準確定量的標準曲線。