人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展

人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)一開始使用基礎(chǔ)培養(yǎng)基（DMEM，DMEM-F12等）配比牛血清的*培養(yǎng)基，因?yàn)榕Ｑ遄鳛楫愒次?，可能?huì)帶來(lái)病原體污染，此后有使用人血清、血小板裂解液和臍帶血清等作為替代，雖然也不能*免除威脅。血清和這些替代品還有一個(gè)缺點(diǎn)，都是天然產(chǎn)物，批次間并不穩(wěn)定，不利于研究和臨床應(yīng)用所需的一致性。

隨著臍帶華通氏膠MSC等各種間充質(zhì)干細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)，間充質(zhì)干細(xì)胞能大量獲得，MSC治療發(fā)展后，培養(yǎng)基批次穩(wěn)定、沒(méi)有污染是必要條件，商用的無(wú)血清培養(yǎng)基因而成為*選擇。

1.0 時(shí)代 培養(yǎng)基+牛血清

2.0 時(shí)代 培養(yǎng)基+牛血清替代品

3.0時(shí)代 無(wú)血清、成分確定的培養(yǎng)基

1 HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基

CCGmHuM^TM 是一款成分確定、無(wú)血清、無(wú)異源物，無(wú)需鋪板膠的*培養(yǎng)基。適用臍帶脂肪等來(lái)源的人間充質(zhì)干細(xì)胞的原代培養(yǎng)。培養(yǎng)的hMSC可傳多代。基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加HEPES和L-谷氨酰胺。細(xì)胞因子添加物中含有多種細(xì)胞生長(zhǎng)因子、粘附蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、微量元素和人白蛋白等成分。

2 StemCell MesenCult 人間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基

MesenCult是一款標(biāo)準(zhǔn)的無(wú)血清、無(wú)異源MSC培養(yǎng)基。優(yōu)化用于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)和CFU-F 分析。

3 Gibco StemPro MSC SFM 人間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基

StemPro MSC SFM是間充質(zhì)干細(xì)胞的*款商用無(wú)血清培養(yǎng)基，而且已經(jīng)被FDA批準(zhǔn)作為醫(yī)療產(chǎn)品使用。

干細(xì)胞行業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)化

2015年國(guó)家政策重新開放干細(xì)胞行業(yè)以來(lái)，衛(wèi)計(jì)委等已經(jīng)發(fā)布了多個(gè)文件：

《國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃干細(xì)胞與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)重點(diǎn)專項(xiàng)實(shí)施方案（征求意見稿）》

目標(biāo)：凝聚優(yōu)勢(shì)力量，重點(diǎn)針對(duì)干細(xì)胞發(fā)生，發(fā)育和形成功能細(xì)胞過(guò)程中的重要科學(xué)問(wèn)題，深入開展干細(xì)胞、生物材料、組織工程、生物人工器官，以及干細(xì)胞與疾病發(fā)生等方面的基礎(chǔ)研究、應(yīng)用基礎(chǔ)研究和轉(zhuǎn)化開發(fā)。整體提升我國(guó)干細(xì)胞及其轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的實(shí)力，加快科研成果的應(yīng)用。

《干細(xì)胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則》（試行）（征求意見稿）

培養(yǎng)基部分：

若使用商業(yè)來(lái)源培養(yǎng)基，應(yīng)選擇有資質(zhì)的生產(chǎn)商并由其提供培養(yǎng)基的組成成分資料及相關(guān)質(zhì)量合格證明。必要時(shí)，應(yīng)由專業(yè)檢定機(jī)構(gòu)對(duì)每批培養(yǎng)基進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)，并出具檢驗(yàn)報(bào)告。

除特殊情況外，應(yīng)盡可能避免在干細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中使用人源或動(dòng)物源性血清，不得使用同種異體人血清或血漿。如必須使用動(dòng)物血清，應(yīng)確保其無(wú)特定動(dòng)物源性病毒污染。嚴(yán)禁使用海綿體狀腦病流行區(qū)來(lái)源的牛血清。

《干細(xì)胞臨床研究管理辦法（試行）》關(guān)于干細(xì)胞臨床研究的醫(yī)療機(jī)構(gòu)的條件與責(zé)任、干細(xì)胞臨床研究的立項(xiàng)與備案、臨床研究流程及要求、臨床研究報(bào)告制度、專家委員會(huì)責(zé)任和監(jiān)督管理。

《*干細(xì)胞臨床研究機(jī)構(gòu)名單》*30家單位

《第二批干細(xì)胞臨床研究備案機(jī)構(gòu)》次批72家單位 2017年11月

《干細(xì)胞通用要求》圍繞干細(xì)胞制劑的安全性、有效性及穩(wěn)定性等關(guān)鍵問(wèn)題，建立了干細(xì)胞的供者篩查、組織采集、細(xì)胞分離、培養(yǎng)、凍存、復(fù)蘇、運(yùn)輸及檢測(cè)等的通用要求。

在大形勢(shì)下，間充質(zhì)干細(xì)胞的治療應(yīng)用同樣在規(guī)范化。《人類間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)建設(shè)與管理規(guī)范》規(guī)定了人體來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)相關(guān)的生命倫理、間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)建設(shè)、機(jī)構(gòu)設(shè)置、操作規(guī)范和安全管理的基本方法。

間充質(zhì)干細(xì)胞

間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）來(lái)源于中胚層，是一種類似成纖維細(xì)胞樣形態(tài)，貼壁生長(zhǎng)，表達(dá)CD105、CD73、CD90，不表達(dá)CD45、CD34、CD14或CD11b、CD79a或CD19的細(xì)胞；它可以從骨髓、脂肪、臍帶華通氏膠、胎盤、臍帶血、牙髓、絨毛膜等多種組織中被分離出來(lái)；它是具有高度自我更新能力和多向分化潛能的多能干細(xì)胞，能體外培養(yǎng)并在特定條件下分化為神經(jīng)細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等。MSCs在細(xì)胞治療中有廣泛的用途，包括組織工程、再生醫(yī)學(xué)和被用作基因治療的載體。

羊水也含間充質(zhì)干細(xì)胞

不同來(lái)源的人類間充質(zhì)干細(xì)胞

——《人類間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)建設(shè)與管理規(guī)范》

新生兒臍帶來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞

新生兒胎盤來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞

新生兒臍帶血來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞

人類脂肪來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞

人類牙髓來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞

人類骨髓來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞

人類子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞

人類羊水來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞

人類母乳來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞

人類滑膜來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞

無(wú)血清培養(yǎng)基

無(wú)血清培養(yǎng)基(serum free medium, SFM)：是不需要添加血清就可以維持細(xì)胞在體外較長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)繁殖的合成培養(yǎng)基。簡(jiǎn)單地認(rèn)為是體外細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的細(xì)胞培養(yǎng)基中不含有動(dòng)物或人的血清，稱為無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基。無(wú)血清培養(yǎng)基的基本配方是基本成分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基及添加組分兩大部分。大多數(shù)的無(wú)血清培養(yǎng)基含有必須的向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)離子的轉(zhuǎn)鐵蛋白和調(diào)節(jié)葡萄糖攝取量的胰島素，以及一些蛋白質(zhì)如纖連蛋白、球蛋白、細(xì)胞生長(zhǎng)因子等。

無(wú)血清培養(yǎng)基被廣泛的應(yīng)用于培養(yǎng)哺乳動(dòng)物和無(wú)脊動(dòng)物細(xì)胞以制備單克隆抗體、病毒抗原、重組蛋白、疫苗等的生產(chǎn)。

無(wú)血清培養(yǎng)基應(yīng)用的優(yōu)點(diǎn)：（1）成分的限定性；（2）產(chǎn)品質(zhì)量一致性；（3）簡(jiǎn)化生產(chǎn)過(guò)程；（4）易于控制培養(yǎng)環(huán)境；（5）細(xì)胞類型的優(yōu)化配方。

參考文獻(xiàn)

1  Dolly Mushahary,et al.Isolation, C*tion, and Characterization of Human Mesenchymal Stem Cells.

2 人類間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)建設(shè)與管理規(guī)范，SZDB/Z 126-2015.

紅榮微再（上海）生物工程技術(shù)有限公司主營(yíng)：干細(xì)胞、醫(yī)療、細(xì)胞治療、器官再生 四大板塊的產(chǎn)品，以“傳遞科學(xué)價(jià)值，服務(wù)科學(xué)研究”為宗旨，以“Focus on Tissue and Organ Regeneration專注組織器官再生與功能重建”為己任，我們與客戶攜手為中國(guó)再生醫(yī)學(xué)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展而前行。