免疫細胞無血清培養(yǎng)基可用于臍帶血或外周血中分離到的單核細胞向CIK細胞(細胞因子誘導的殺傷細胞)的體外誘導及體外大規(guī)模擴增培養(yǎng)。
免疫細胞無血清培養(yǎng)基使用方法
1、采集與分離外周血采集外周血,Ficoll密度梯度離心分離收集單個核細胞。
2、單個核細胞的接種與誘導活化
1) 0d時,繃胞計數。按細胞密度2x106cell/mL接種至對應體積的培養(yǎng)液中。添加誘導因子YC001一支。添加10%比例的自體血漿。
2) 1d時(24小時),添加誘導因子YC002、YC003、YC004至已經接種細胞的培養(yǎng)液中。將YC005添加至未經使用的培養(yǎng)基中,待用。
3、細胞的連續(xù)培養(yǎng)與擴增
1) 3d時,補入新鮮培養(yǎng)液,調整細胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同時添加新加入培養(yǎng)液體積l10%比例的自體血漿。補液比例大致在1:2左右(原有培養(yǎng)液體積:新加培養(yǎng)液體積)
2) 5d時,補入新鮮培養(yǎng)液,調整細胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。補液比例大致在1:3左右。
3) 7d時,補入新鮮培養(yǎng)液,調整細胞密度至(06-08)x106cell/mL。補液比例大致在1:2左右。
4) 9d時,將剩余培養(yǎng)液全部加入。
主要特點
1、無血清、不含異源動物成分;所有成分都是明確的,且同種來源(人),包括蛋白質;不含抗生素;
2、能夠培養(yǎng)人淋巴細胞、CIK、DC、NK等各類免疫細胞;
3、具有很高的成活率和擴增倍數;
4、能夠維持高密度培養(yǎng);
5、具有很高的殺傷活性。
注意事項
1、如果觀察培養(yǎng)基種有可見的沉淀物,不能再使用;
2、超過標簽上的截止使用日期,不得再使用;
3、所有組分均應避光保存;
5、本產品請于陰涼干燥處避光保存,保存條件:2-8℃,避免反復凍融。拆封后請于2周內用完。