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一起來了解一下免疫細胞無血清培養(yǎng)基的使用方法吧

更新時間:2020-04-15瀏覽:1533次

  免疫細胞無血清培養(yǎng)基可用于臍帶血或外周血中分離到的單核細胞向CIK細胞(細胞因子誘導的殺傷細胞)的體外誘導及體外大規(guī)模擴增培養(yǎng)。
 
  免疫細胞無血清培養(yǎng)基使用方法
 
  1、采集與分離外周血采集外周血,Ficoll密度梯度離心分離收集單個核細胞。
 
  2、單個核細胞的接種與誘導活化
 
  1) 0d時,繃胞計數。按細胞密度2x106cell/mL接種至對應體積的培養(yǎng)液中。添加誘導因子YC001一支。添加10%比例的自體血漿。
 
  2) 1d時(24小時),添加誘導因子YC002、YC003、YC004至已經接種細胞的培養(yǎng)液中。將YC005添加至未經使用的培養(yǎng)基中,待用。
 
  3、細胞的連續(xù)培養(yǎng)與擴增
 
  1) 3d時,補入新鮮培養(yǎng)液,調整細胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同時添加新加入培養(yǎng)液體積l10%比例的自體血漿。補液比例大致在1:2左右(原有培養(yǎng)液體積:新加培養(yǎng)液體積)
 
  2) 5d時,補入新鮮培養(yǎng)液,調整細胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。補液比例大致在1:3左右。
 
  3) 7d時,補入新鮮培養(yǎng)液,調整細胞密度至(06-08)x106cell/mL。補液比例大致在1:2左右。
 
  4) 9d時,將剩余培養(yǎng)液全部加入。
 
  主要特點
 
  1、無血清、不含異源動物成分;所有成分都是明確的,且同種來源(人),包括蛋白質;不含抗生素;
 
  2、能夠培養(yǎng)人淋巴細胞、CIK、DC、NK等各類免疫細胞;
 
  3、具有很高的成活率和擴增倍數;
 
  4、能夠維持高密度培養(yǎng);
 
  5、具有很高的殺傷活性。
 
  注意事項
 
  1、如果觀察培養(yǎng)基種有可見的沉淀物,不能再使用;
 
  2、超過標簽上的截止使用日期,不得再使用;
 
  3、所有組分均應避光保存;
 
  5、本產品請于陰涼干燥處避光保存,保存條件:2-8℃,避免反復凍融。拆封后請于2周內用完。