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首頁(yè) > 產(chǎn)品中心> PCR相關(guān)試劑耗材> 提取試劑> CW2105S康為世紀(jì) 無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒
康為世紀(jì) 無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒

簡(jiǎn)要描述:產(chǎn)品名稱:康為世紀(jì) 無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):CW2105S
英文名稱:EndoFree Plasmid Midi Kit
產(chǎn)品規(guī)格:50 preps

  • 產(chǎn)品型號(hào):CW2105S
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2022-02-23
  • 訪  問(wèn)  量:2782
詳細(xì)介紹
品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

產(chǎn)品介紹:

 內(nèi)毒素是質(zhì)粒提取中常見(jiàn)的污染物,由于真核細(xì)胞對(duì)內(nèi)毒素非常敏感,因此,如果質(zhì)粒中含有內(nèi)毒素會(huì)大大降低真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率。本試劑盒提供一種簡(jiǎn)單、快捷、高效提取無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒的新方法,提取的質(zhì)粒最大限度去除內(nèi)毒素,并能有效去除基因組DNA、RNA、蛋白等污染。

  本試劑盒適合提取5-15ml菌液,在堿裂解法裂解細(xì)胞的基礎(chǔ)上通過(guò)新型硅基質(zhì)膜高效專一的結(jié)合質(zhì)粒DNA,每個(gè)吸附柱最高可吸附100 μg的質(zhì)粒DNA,同時(shí)采用特殊的緩沖液系統(tǒng)和除內(nèi)毒素過(guò)濾柱,有效去除內(nèi)毒素、蛋白等雜質(zhì)。由本試劑盒所得質(zhì)粒純度高、質(zhì)量穩(wěn)定,特別適用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染,同時(shí)也可用于DNA測(cè)序,PCR,基于PCR的突變,體外轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)化細(xì)菌,內(nèi)切酶消化等下游實(shí)驗(yàn)。



產(chǎn)品名稱:康為世紀(jì) 無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào):CW2105S


額外試劑要求:

無(wú)水乙醇,異丙醇。


產(chǎn)品組分:

組分2.png


實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:

1.所有組分可在干燥、室溫(15-30℃)環(huán)境穩(wěn)定保存1年,更長(zhǎng)時(shí)間保存可置于2-8℃,加入RNase A的Buffer P1 置于2-8℃可穩(wěn)定保存6個(gè)月。

2.第一次使用前,將RNase A溶液全部加入到Buffer P1中,混勻,置于2–8℃保存,使用前需在室溫中放置一段時(shí)間,恢復(fù)至室溫后使用。

3.第一次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說(shuō)明在Buffer PW中加入無(wú)水乙醇。

4.使用前請(qǐng)先檢查Buffer P2 和Buffer E3是否出現(xiàn)結(jié)晶或沉淀,如有結(jié)晶或沉淀現(xiàn)象,可在37℃水浴幾分鐘,即可恢復(fù)澄清。

5.注意不要直接接觸Buffer P2和Buffer E3,使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子。

6.提取質(zhì)粒的量和純度與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、菌株種類、質(zhì)粒大小、質(zhì)??截悢?shù)等因素有關(guān)。



使用說(shuō)明:

1.取5-15 ml過(guò)夜培養(yǎng)的菌液,加入離心管(自備)中,13,000 rpm(~16,200×g)離心1分鐘收集細(xì)菌,盡量吸棄全部上清。

2.向留有菌體沉淀的離心管中加入500 μl Buffer P1(請(qǐng)先檢查是否已加入RNase A),使用移液器或渦旋振蕩器充分混勻,懸浮細(xì)菌沉淀。

3.向離心管中加入500 μl Buffer P2,溫和地上下顛倒混勻8-10次,使菌體充分裂解,室溫放置3-5分鐘。此時(shí)溶液應(yīng)變得清亮粘稠。

4.向離心管中加入500 μl Buffer E3,立即上下顛倒混勻8-10次,此時(shí)出現(xiàn)白色絮狀沉淀,室溫放置5分鐘。13,000 rpm離心5分鐘,吸取上清,將上清加入過(guò)濾柱(Endo-RemoverFM)中(已裝入收集管),13,000 rpm離心1分鐘過(guò)濾,將收集管中的濾液轉(zhuǎn)移到離心管(自備)中。

5.向?yàn)V液中加入450 μl異丙醇,上下顛倒混勻。

6.柱平衡:向已裝入收集管的吸附柱(Spin Columns DL)中加入200 μl Buffer PS,13,000 rpm離心2分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

7.將步驟5中濾液與異丙醇的混合溶液轉(zhuǎn)移到平衡好的吸附柱(已裝入收集管)中。

8.13,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

9.向吸附柱中加入750 μl Buffer PW(請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇),13,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液。

10.將吸附柱重新放回收集管中,13,000 rpm離心1分鐘。

11.將吸附柱置于一個(gè)新的離心管(自備)中,向吸附膜的中間部位加入100-200 μl Endo-Free Buffer EB,室溫放置2-5分鐘,13,000rpm離心2分鐘。-20℃保存質(zhì)粒。


保存條件:室溫(15-30℃)


產(chǎn)品訂購(gòu)信息:

品牌             貨號(hào)             名稱                                     規(guī)格

康為世紀(jì)  CW2105S  EndoFree Plasmid Midi Kit     50 preps


產(chǎn)品名稱:康為世紀(jì) 無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào):CW2105S



關(guān)于公司:

康為世紀(jì)是主要從事高附加值、高技術(shù)含量的生物試劑的研發(fā)與生產(chǎn),為生命科學(xué)研究、基因檢測(cè)和體外診斷用戶提供創(chuàng)新型生物產(chǎn)品和服務(wù)??禐槭兰o(jì)建立了專業(yè)化、集約化、能夠形成自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的技術(shù)創(chuàng)新體系和開(kāi)放式的合作創(chuàng)新平臺(tái),構(gòu)建成了公司完整的研發(fā)創(chuàng)新體系。產(chǎn)品線主要包括分子診斷原料酶、核酸采集與保護(hù)劑、核酸提取試劑盒、分子診斷檢測(cè)試劑等,打破了中國(guó)生物研究與產(chǎn)業(yè)對(duì)進(jìn)口試劑的依賴。


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