Product category
品牌 | illumina/美國因美納 | 貨號 | FC-420-1002 |
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè) |
產品名稱:Miniseq High Output Reagent Kit(150-cycles)基因測序試劑盒
產品貨號:FC-420-1002
產品規(guī)格:
大輸出 3.75 Gb(MiniSeq High Output Reagent Kit (150-cycles))
每次運行的大讀數(shù) 高達2500萬
試劑類型 簇生成,配對末端測序,合成測序
核酸類型 DNA,RNA
系統(tǒng)兼容性 MiniSeq
技術 測序
MiniSeq試劑盒 讀數(shù) 套件尺寸(循環(huán)) 通量(大) 2×150通量 2×75通量 1×75通量
MiniSeq高通量套件 25 M 300,150,75 7.5 Gb 7.5 Gb 3.75 Gb 1.875 Gb
Gb =千兆堿基,M =百萬
產品介紹:
MiniSeq系統(tǒng)測序試劑盒為各種規(guī)模的實驗室提供經過驗證的Illumina新一代測序(NGS)的強大功能和可靠性。即使對于少量樣品,也可以獲得經濟高效的測序。這些套件提供:
強大的堿基調用和*信噪比
排序輸出和讀取長度的多個選項
簡單的工作流程,通過將聚類,測序和清洗試劑集成到單個盒中,減少出錯的機會
直觀的標簽和RFID編碼的試劑
使用的Illumina合成測序(SBS)化學優(yōu)化化學
各種應用程序的配置
MiniSeq Reagent Kits提供廣泛的解決方案,適用于從基因表達和小RNA分析到靶向DNA擴增子測序和小基因組測序的各種應用。每個試劑盒都內置了高精度和雙端測序功能。
即用型墨盒重新定義了易用性
用于MiniSeq系統(tǒng)的預配置試劑套件提供了在1個預混合,集成的RFID盒式磁帶上進行集群生成,排序和清洗所需的所有組件。只需將用戶準備的庫池直接加載到MiniSeq系統(tǒng)中。系統(tǒng)自動執(zhí)行模板擴增和測序所需的所有步驟,無需用戶干預。
產品名稱:illumina 病毒基因測序試劑盒 300次 產品貨號:FC-420-1002
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產品名稱:Miniseq High Output Reagent Kit(150-cycles)基因測序試劑盒
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illumina中國授權代理商:華雅再生醫(yī)學旗艦公司:紅榮微再(上海)生物工程技術有限公司
Illumina二代測序技術,邊合成邊測序(SBS),是廣泛采用的新一代測序(NGS)技術,負責產生世界上90%以上的測序數(shù)據。
Illumina的二代測序技術稱為邊合成邊測序(Sequencing-by-Synthesis,簡稱SBS)。SBS主要包括堿基延伸、熒光激發(fā)及信號收集、剪切等3個步驟。這3個步驟可以重復,循環(huán)進行。每循環(huán)一次測定一個堿基。想測定多少個堿基(即讀長),就循環(huán)多少次。測序循環(huán)次數(shù)可以在軟件里設定。到底測序多長合適,要根據項目性質和需求來決定。大多數(shù)情況下,SR實驗(單端測序)測定1x50個堿基,PE實驗(雙端測序)測定2x150個堿基。
1 堿基延伸
Illumina測序試劑里所使用的dNTP級具特色,它們同時具有兩個修飾基團:一個熒光基團,一個可逆終止基團。A、G、C、T 4種堿基分別標記4種不同的熒光基團,它們在不同波長的激光激發(fā)下,能夠發(fā)射不同波長(即顏色)的熒光。熒光顏色與堿基種類一一對應,因此根據激發(fā)光的波長可以識別堿基。4種堿基的終止基團是一樣的。由于終止基團的存在,所有dNTP每次都只能延伸1個堿基,無論給予多長的反應時間。又由于該終止基團是可逆的,在熒光信號收集完畢之后,可以用剪切劑切除該終止基團,使堿基恢復自然的可延伸狀態(tài),這時即可繼續(xù)進行下一輪循環(huán),再測定一個堿基。
可逆終止基團技術是Illumina二代測序的一大特色。它與橋式PCR技術一起,構成了Illumina二代測序的兩大支柱,為穩(wěn)定獲得高質量的測序數(shù)據打下了堅實的基礎。
2 信號采集
HiSeq系列測序儀具有紅綠兩根激光管,兩個濾色片。它們兩兩組合,可以形成4種不同的激發(fā)波長,正好分別用于激發(fā)A、G、C、T 4種堿基。
Cluster上所標記的熒光基團在激光激發(fā)下產生的信號,可以用相機拍攝或者掃描的方式收集信號。掃描技術速度比較快,被X10系列采用。由于FC面積比較大,而且上表面和下表面要分別拍照,所以拍照過程相當耗時。對于經典的HiSeq 2000來說,一次測序循環(huán)所產生的熒光信號,需要大約40分鐘的時間才能拍照收集完畢,時間比測序反應本身還要長。
3 剪切
熒光信號收集完畢后,關閉激光,用剪切劑去除測序引物的延伸產物上的堿基所標記的熒光基團和終止基團。兩個修飾基團均被切除,一方面消去干擾熒光,一方面使鏈末端的堿基回復到自然的可延伸狀態(tài),為下一輪測序做好準備。
再重復合成、激發(fā)、收集等步驟,即可進行第二個堿基的測序。
測序循環(huán)可以重復多次。理論上可以一直重復,直到信噪比降低得無法有效識別堿基信號為止。由于熒光基團的發(fā)光效率持續(xù)不斷在衰減,Taq酶的活性也在持續(xù)不斷地衰減,所以實際上測序循環(huán)次數(shù)是有限的,大重復次數(shù)與sbs試劑的配方有關。測序的循環(huán)次數(shù)可以在軟件設置過程中人為,這個重復次數(shù)就是每個測序片段的讀長。目前,Illumina平臺的讀長有2x100 bp,2x125 bp,2x150 bp,2x300 bp等多種,其中2x150 bp用得zui廣泛。
單端測序:單端測序(Single-read)首先將DNA樣本進行片段化處理形成200-500bp的片段,引物序列連接到DNA片段的一端,然后末端加上接頭,將片段固定在flow cell上生成DNA簇,上機測序單端讀取序列。
雙端測序:雙端測序(Paired-end)方法是指在構建待測DNA文庫時在兩端的接頭上都加上測序引物結合位點,在一輪測序完成后,去除一輪測序的模板鏈,用對讀測序模塊(Paired-End Module)引導互補鏈在原位置再生和擴增,以達到第二輪測序所用的模板量,進行第二輪互補鏈的合成測序。
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